掃描電鏡是用聚焦電子束在試樣表面逐點掃描成像。試樣為塊狀或粉末顆 粒,成像信號可以是二次電子、背散射電子或吸收電子。其中二次電子是主要的成像信號。由電子槍發(fā)射的能量為 5 ~ 35keV 的電子,以其交 叉斑作為電子源,經二級聚光鏡及物鏡的縮小形成具有一定能量、一定束流強度 和束斑直徑的微細電子束,在掃描線圈驅動下,于試樣表面按一定時間、空間順序作柵網式掃描。聚焦電子束與試樣相互作用,產生二次電子發(fā)射(以及其它物 理信號),二次電子發(fā)射量隨試樣表面形貌而變化。二次電子信號被探測器收集 轉換成電訊號,經視頻放大后輸入到顯像管柵極,調制與入射電子束同步掃描的 顯像管亮度,得到反映試樣表面形貌的二次電子像。下面小編為您介紹如何對掃描電鏡的樣品處理,共有四點大家牢記。
1、主要包括表面清洗、固定、沖洗和脫水處理,基本類似于透射電鏡樣品的處理,但有其特殊性。
2、樣品尺寸略大于TEM樣品,8 ~ 10mm2,高約5mm。
3、常見的固定和脫水方法有戊二醛-四氧化二砷雙重固定或戊二醛單一固定。
4、組織電導技術: 該技術的目的是提高樣品的電導率,克服生物材料的電荷效應,提高樣品表面的二次電子發(fā)射率。
干燥好的樣品若暫時不用,可放在干燥器或真空中保存,樣品粘臺后要放入透射電鏡底片抽氣室預抽氣數小時再放入掃描電鏡觀察。加速電壓不宜用得過高,滿足要求即可,能用低電壓就不用高電壓。放大倍數不超過一萬倍時一般15-20 KV 就可以了。同時,應保持工作電壓與工作水平距離的相對穩(wěn)定,如無特殊需要,不要經常換電壓與工作人員的距離。因為頻繁改掃描電鏡工作環(huán)境參數不利于掃描電鏡穩(wěn)定的工作。